期刊简介
本刊系教育部主管、四川大学华西医院主办，主要刊登普外专业和相关学科的临床成果，以及与临床联系紧密的基础研究、实验研究成果与进展，主要设有基础与实验研究、临床研究、临床经验交流、新术式及新技术介绍、论著摘要、腹部影像、讲座、继续教育问答、综述等栏目，并且根据普外专业特点每期就某一热点问题开设述评、专家论坛等栏目进行重点讨论。本刊为中国科技论文统计源期刊（中国科技核心期刊）、《中国科技引文数据库》及《中国学术期刊综合评价数据库》来源期刊，被俄罗斯文摘（AJ）、美国化学文摘（CA）以及国内CMB、CMCC、《中国期刊网》、《中国学术期刊（光盘版）》、《万方数据——数字化期刊群》等收录。
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首页>中国普外基础与临床杂志
- 杂志名称：中国普外基础与临床杂志
- 主管单位：中华人民共和国教育部
- 主办单位：四川大学华西医院
- 国际刊号：1007-9424
- 国内刊号：51-1505/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：1999年获四川省高等学校优秀学报优秀期刊奖期刊收录：上海图书馆馆藏, 维普收录(中), 万方收录(中), CA 化学文摘(美), 哥白尼索引(波兰), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中)
siRNA表达载体对肝素酶基因的沉默作用
刘启志；王烈
关键词：RNA干扰, 肝素酶, 质粒, MDA-MB-231细胞株, 转染, 实时定量PCR
摘要：目的 根据基因库中的人肝素酶(HPSE)基因序列,构建针对肝素酶基因的小干扰RNA(siRNA)及其表达载体,转染MDA-MB-231细胞后观察其对肝素酶基因的干扰作用. 方法设计肝素酶靶向的发夹状siRNA,合成2条互补的寡核苷酸链共4对,退火后连接入pGPU6/GFP/Neo载体,转化后进行序列鉴定,转染MDA-MB-231细胞,荧光照片,RT-PCR (real-time PCR)检测肝素酶mRNA的表达情况. 结果设计出4条针对肝素酶的siRNA,将退火后的双链寡核苷酸片段克隆到pGPU6/GFP/Neo载体,经过阳性菌落酶切鉴定与测序,结果正确.再将siRNA载体转染到MDA-MB-231细胞株,RT-PCR检测肝素酶mRNA表达明显降低(P<0.05).结论 成功构建了针对肝素酶基因的siRNA载体,转染到MDA-MB-231细胞株后细胞肝素酶基因的表达明显降低,从而为肿瘤治疗提供了一种新的方法.
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