期刊简介

               本刊系教育部主管、四川大学华西医院主办,主要刊登普外专业和相关学科的临床成果,以及与临床联系紧密的基础研究、实验研究成果与进展,主要设有基础与实验研究、临床研究、临床经验交流、新术式及新技术介绍、论著摘要、腹部影像、讲座、继续教育问答、综述等栏目,并且根据普外专业特点每期就某一热点问题开设述评、专家论坛等栏目进行重点讨论。本刊为中国科技论文统计源期刊(中国科技核心期刊)、《中国科技引文数据库》及《中国学术期刊综合评价数据库》来源期刊,被俄罗斯文摘(AJ)、美国化学文摘(CA)以及国内CMB、CMCC、《中国期刊网》、《中国学术期刊(光盘版)》、《万方数据——数字化期刊群》等收录。                

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  • 杂志名称:中国普外基础与临床杂志
  • 主管单位:中华人民共和国教育部
  • 主办单位:四川大学华西医院
  • 国际刊号:1007-9424
  • 国内刊号:51-1505/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:1999年获四川省高等学校优秀学报优秀期刊奖期刊收录:上海图书馆馆藏, 维普收录(中), 万方收录(中), CA 化学文摘(美), 哥白尼索引(波兰), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中)
中国普外基础与临床杂志2014年第12期

人分化抑制蛋白1慢病毒干扰载体的构建、筛选及其沉默效应的鉴定

丁睿;李霄;窦科峰

关键词:分化抑制蛋白1, 慢病毒干扰载体, 基因沉默, HepG2细胞系, 肝细胞肝癌
摘要:目的 探索以小干扰RNA (siRNA)慢病毒干扰载体组建的慢病毒对人HepG2细胞分化抑制蛋白1(Id1)基因的沉默效应.方法 构建4种针对Id1基因不同干扰靶点的Id1-siRNA慢病毒干扰载体(pCGSIL-GFP-Id1-1、pCGSIL-GFP-Id1-2、pCGSIL-GFP-Id1-3及pCGSIL-GFP-Id1-4),将其转染至293T细胞,以筛选出针对Id1基因的有效的RNA干扰(RNAi)靶序列.再以沉默效果优的干扰载体进一步构建慢病毒(Id1-RNAi-LV),感染人HepG2细胞后,采用实时定量PCR法和Western blot法分别检测其Id1 mRNA及其蛋白的表达水平.结果 与pCGSIL-GFP-Id1-1组、pCGSIL-GFP-Id1-2组及pCGSIL-GFP-Id 1-3组比较,pCGSIL-GFP-Id1-4组的Id1蛋白表达水平低(P<0.05),沉默效果优.以pCGSIL-GFP-Id1-4干扰载体组建慢病毒后,测得慢病毒的病毒滴度为2.0×109 TU/mL.与空白对照组和阴性对照组比较,以组建的慢病毒感染人HepG2细胞后,人HepG2细胞中Id1mRNA及其蛋白的表达水平均降低(P<0.05).结论 本实验构建的特异性慢病毒可稳定地介导Id1基因的沉默.