黄芪多糖对脑死亡状态下肝脏的保护作用

摘要：目的 探讨脑死亡状态下黄芪多糖(Astragalus polysaccharide,APS)对肝脏损伤的保护作用及其机制.方法 将24只健康成年雄性新西兰兔随机分为3组:空白对照组、脑死亡组和APS组,每组8只.3组均于处理后4h和8h时处死4只新西兰兔获取血液和肝组织标本.空白对照组:于颅顶钻孔、颅内置Foley球囊导管,但不加压,维持麻醉.脑死亡组:建立渐进性颅内加压脑死亡模型.APS组:诱导麻醉后立即经股静脉推注注射用APS 12 mg/kg,建模处理同脑死亡组.采用全自动生化分析仪检测血液标本中的血清天冬氨酸氨基转移酶(aminotrans-ferase,AST)和丙氨酸氨基转移酶(alanine amino-transferase,ALT)水平,采用ELISA试剂盒检测肿瘤坏死因子α (TNF-α)水平;采用HE染色观察肝脏组织的组织学变化;采用SP免疫组化染色方法检测肝脏组织中核转录因子p65蛋白(NF-κB p65)的表达.结果 ①ALT和AST.不论是4h还是8h时,同时点与空白对照组比较,脑死亡组和APS组的ALT和AST水平均较高(P＜0.05),且各时点脑死亡组的ALT和AST水平均高于APS组(P＜0.05).同组内比较,8h时空白对照组的ALT和AST水平与4h比较差异均无统计学意义(P＞0.05);8h时脑死亡组的ALT和AST水平与4h时比较均升高(P＜0.05);8h时APS组的ALT水平与4h比较有所升高(P＜0.05),但AST水平与4h比较差异无统计学意义(P＞0.05).②TNF-α.不论是4h还是8h时,同时点与空白对照组比较,脑死亡组和APS组的TNF-α水平均较高(P＜0.05),且各时点脑死亡组的TNF-α水平均高于APS组(P＜0.05).同组内比较,8h时空白对照组的TNF-α水平与4h比较差异无统计学意义(P＞0.05);8h时脑死亡组和APS组的TNF-α水平比4h均有所升高(P＜0.05).③HE染色结果.4h时空白对照组、脑死亡组和APS组的肝脏组织结构基本正常,无明显改变.8h时脑死亡组的肝细胞呈气球样改变,排列紊乱,胞质疏松淡染呈网状,汇管区见大量炎性细胞浸润,表现为较为明显的组织损伤.8h时APS组的肝细胞轻度水肿,排列正常,少量炎性细胞浸润,组织形态损伤较脑死亡组8h时明显减轻.④SP免疫组化染色结果.4h时空白对照组、脑死亡组和APS组肝组织中NF-κB p65蛋白的表达水平比较差异无统计学意义(P＞0.05).8h时脑死亡组和APS组肝组织中NF-κB p65蛋白的表达水平均高于空白对照组8h时(P＜0.05),且脑死亡组肝组织中NF-κB p65蛋白的表达水平高于APS组(P＜0.05).同组内比较,8h时空白对照组肝组织中NF-κB p65蛋白的表达水平与4h比较差异无统计学意义(P＞0.05),但8h时脑死亡组和APS组肝组织中NF-κB p65蛋白的表达水平均高于对应组4h时(P＜0.05).结论 脑死亡可导致肝脏损害,8h时的损害程度较4h重;APS对脑死亡后的肝脏损害具有保护作用,其可能机制为通过抑制TNF-α的生成以及抑制NF-κB信号通路的活化,从而减轻脑死亡后炎症反应对肝脏的损伤.